Ca2+- Konzentration in Zellen mit Hlfe der Mikroskopie zu bestimmen,...
16:41 / 20.07.2010
Ca2+- Konzentration in Zellen mit Hlfe der Mikroskopie zu bestimmen, das wurde mir heute gezeigt, bzw. führte ich auch eigenständig Messungen durch.
Zuerst muss man auf ein Glas-slide ein Protein auftragen. Dann trägt man einen Antikörper auf, der an dieses Protein mit seinem Rezeptor bindet. Überschüssiger Antikörper, der nicht gebunden ist, wird weggewaschen. Anschließend versetzt man Zellen die man untersuchen will mit einem Farbstoff (Indo 1)
Nun trägt man diese Zellen ebenfalls auf. Gemessen wird mit den Wellenlängen 410nm (wenn der Farbstoff mit Ca2+ gesättigt ist) und 485nm (wenn keine Calcium-Ionen vorhanden sind). Aus den unterschiedlichen Intensitäten kann man nun die Calcium 2+ Konzentration berechnen.
Zuerst muss man auf ein Glas-slide ein Protein auftragen. Dann trägt man einen Antikörper auf, der an dieses Protein mit seinem Rezeptor bindet. Überschüssiger Antikörper, der nicht gebunden ist, wird weggewaschen. Anschließend versetzt man Zellen die man untersuchen will mit einem Farbstoff (Indo 1)
Nun trägt man diese Zellen ebenfalls auf. Gemessen wird mit den Wellenlängen 410nm (wenn der Farbstoff mit Ca2+ gesättigt ist) und 485nm (wenn keine Calcium-Ionen vorhanden sind). Aus den unterschiedlichen Intensitäten kann man nun die Calcium 2+ Konzentration berechnen.
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