20:03 / 10.08.2006
Um bei Mäuseböcken Sperma zu bekommen muss man diese leider töten und den Samenleiten mit den Nebenhoden (glaube ich) herausnehmen. Diesen legt man sofort in CPA, das ist das Einfriermedium. Dann durchstöchert man diese und streicht sie heraus. Bevor dem einfrieren haben wir die Spermien mit einen Computer und Mikroskop mit Hilfe von Zählkammern gezählt und festgestellt ob die Mobilität passt, ob Kopf oder Schanzfehlstellungen vorhanden sind und die Spermadichte. Nachher kann man sie einfrieren. Man nimmt Strohs und zieht als erster Luft, dann das Sperma und dann wieder Luft und gibt eine bestimmte Kapsel darauf. Die Kapselen haben verschiedene Farben, damit man weiß welches Sperma von welchem Bock ist. Nachher legt man es als erster in den flüssig Stickstoffdampf für zehn Minuten bei ung. -120 Grad und dann in den flüssigen Stickstoff. Und schon sind die Spermien eingefroren. Heute haben wir dann noch eine Institutsbesprechung gehabt und am Nachmittag ist es mit der PCR weiter gegangen. Am Mittwoch haben wir ja Haare von Mäusen genommen und die DNA herausgelöst. Mit Hilfe eines Primer hat man die bestimmte Sequenz der DNA die man haben will vervielfacht. Heute haben wir dann mit Hilfe eines Gelbads geschaut ob wir alles richtig gemacht haben. Und Siehe da man hat was gesehen. Wir als Team waren aber noch nicht ganz begeistert und werden es morgen noch einmal versuchen.
Embryonentransfer muss noch immer warten. Bekomme von allen noch ein paar Infos die ich dann an euch weiterleite.
Um bei einer Maus die richtigen Sachen zu finden muss man die Anatomie kennen. Hier eine gute Seite www. geocities.com/virtualbiology/necropsy