Methoden / Experimente
14:34 / 22.06.2010
Um Virusinfektionen von Hunden nachzuweisen, haben wir drei verschiedene Methoden verwendet: Nachweise von Antikörpern, die zur Serologie gehören, Antigen-Nachweise und schließlich molekularbiologische Methoden, in welchen Nachweiseverfahren für virale Nukleinsäuren mittels der Polymerasen Kettenreaktion(PCR) eine zentrale Rolle spielen.
Beim Antikörper-Nachweis wird eine Ag-Ak-Reaktion im Serum des Hundes sichtbar gemacht. Dafür werden mit einem Farbstoff konjugierte Antikörper verwendet, die im UV-Licht fluoreszieren, falls schon eine Reaktion stattgefunden hat. Auf diese Weise wird ein indirekter Nachweis von Viren ermöglicht.
Der Antigen-Nachweis erfolgt mittels des immun-chromatographischen Tests. Es wird eine Mischung aus Antikörpern spezifisch für das nachzuweisende Virus verwendet, die in der Lage sind das Virus zu erkennen.
Durch die molekularbiologische Methode können virale Nukleinsäuren in den Proben nachgewiesen werden. Dies wird durch die Polymerase Kettenreaktion ermöglicht (PCR), die zur Vervielfachung der DNA dient. ES gibt zwei Arten von PCR: die konventionelle PCR, die nur ein qualitatives Ergebnis liefert, und die Real-Time PCR, die auch einen quantitativen Nachweis möglich macht.
Beim Antikörper-Nachweis wird eine Ag-Ak-Reaktion im Serum des Hundes sichtbar gemacht. Dafür werden mit einem Farbstoff konjugierte Antikörper verwendet, die im UV-Licht fluoreszieren, falls schon eine Reaktion stattgefunden hat. Auf diese Weise wird ein indirekter Nachweis von Viren ermöglicht.
Der Antigen-Nachweis erfolgt mittels des immun-chromatographischen Tests. Es wird eine Mischung aus Antikörpern spezifisch für das nachzuweisende Virus verwendet, die in der Lage sind das Virus zu erkennen.
Durch die molekularbiologische Methode können virale Nukleinsäuren in den Proben nachgewiesen werden. Dies wird durch die Polymerase Kettenreaktion ermöglicht (PCR), die zur Vervielfachung der DNA dient. ES gibt zwei Arten von PCR: die konventionelle PCR, die nur ein qualitatives Ergebnis liefert, und die Real-Time PCR, die auch einen quantitativen Nachweis möglich macht.