Wow, es tut mir echt leid, dass ich so lang schoin nicht mehr in meinén Blog geschrieben habe und die Allgemeinheit nicht Anteil habe lassen an meinen Aufgaben und Erfahrungen.
Also diese, meine zweite Woch ist viel passiert. Wie waren am Biocenter in der Dr. Bohr-Gasse woe wir mit Eva Histologien gemacht haben, das heißt Gewebsschnitte von Mäusedärmen.
Zuerst haben wir die bereits in Paraffin eingebetteten Därme in hauchdünne Scheibchen (5µm) geschnitten mit dem sogenannten Mikrotom, was schwieriger war als gedacht. Diese Scheibchen kamen dann auf Slides.... Danach kamen diese Slides in Xylol, dann in verschieden hoch konsentriertes Ethanol und Wasser. Danach wusch man sie mit Wasser und PBS-T. Nach dieser Prozedur gab man Buffer dazu und erhitzte diesen auf 95°C. Weiter blockte man mit Ziegenserum. Dann kam der erste Antikörper hinzu, es wurde gewaschen mit PBS-T, der zweite gelabelte Antikörper hinzugegeben und wieder mit PBS-T gewaschen. Dann gab man Färbesubstrat dazu. Dann noch mal gewaschen und dann mit wasserlöslichen Produkt eingedeckelt.
Wir haben zwei verschiedene Färbetechniken kennengelernt: die HE-Färbung und die Immunhistochemie....
mir hat die Histologie extrem gut gefallen.
Am Donnerstag haben wir dann unseren Westernblot vom Freitag ausgewertet und eine Protein-Ladeprobe durchgeführt, um zu überprüfen, ob auch alles gleich geladen ist. Hierfür kam ein Stropbuffer über Nacht auf die Membranen, damit der Antikörper runter ging, dann nach kamen wieder erster und zweiter Antikörper darauf und dann wurde noch einmal entwickelt.
Am Freitag haben wir dann (fast) vollkommen selbstständig noch einen Westernblot gemacht...