Methoden / Experimente
22:17 / 12.07.2010
So, heute doch einiges gelernt:
qPCR, qRTPCR: in dieser wird ein bestimmter Genabschnitt so vervielfacht, dass die Anzahl exponential ansteigt. Durch einen fluoreszierenden Farbstoff wird es dann sichtbar. Das wird durch den Computer auf einer Kurve dargestellt. Es wird eine Referenzkurve von einem Gen (in diesem Fall Actin) bei dem die Probe bei einem bestimmten Wert steigt. Die anderen Proben werden dann mit dieser in Differenz gesetzt, dadurch hält man das Verhältnis. eine qPCR ohne Rechnung liefert nur Verhältnisse! Zahlen (in Form von x-mal öfter als ... enthalten) lassen sich in Excel berechnen.
SYBR-green-Mix: ist ein MIX aus dNTPs, Polymerase, Puffer und eben dem benötigten Fluoreszenzfarbstoff (in diesem Fall grün).
cyclinD1: ist ein Indikator dafür, ob die Zelle im Zellzyklus ist und sich teilt; bei Krebs fallen viele Zellteilungen an; bei RANK ist es aktiviert, cyclinD1 ist bei der Brustdrüsenentwicklung avtiv
Toll-like Receptor Signaling: es gibt 9 verschiedene toll-like rezeptoren. Nur für 2 ist MyD88 nicht unbedingt erforderlich. Die Rezeptoren erkennen Pathogene wie Viren, Bakterien etc. Sie lösen Kettenreaktionen aus, um dann verschiedene Reaktionen im Immunsystem und im Genom zu aktivieren, um diese Pathogene zu deaktivieren.
qPCR, qRTPCR: in dieser wird ein bestimmter Genabschnitt so vervielfacht, dass die Anzahl exponential ansteigt. Durch einen fluoreszierenden Farbstoff wird es dann sichtbar. Das wird durch den Computer auf einer Kurve dargestellt. Es wird eine Referenzkurve von einem Gen (in diesem Fall Actin) bei dem die Probe bei einem bestimmten Wert steigt. Die anderen Proben werden dann mit dieser in Differenz gesetzt, dadurch hält man das Verhältnis. eine qPCR ohne Rechnung liefert nur Verhältnisse! Zahlen (in Form von x-mal öfter als ... enthalten) lassen sich in Excel berechnen.
SYBR-green-Mix: ist ein MIX aus dNTPs, Polymerase, Puffer und eben dem benötigten Fluoreszenzfarbstoff (in diesem Fall grün).
cyclinD1: ist ein Indikator dafür, ob die Zelle im Zellzyklus ist und sich teilt; bei Krebs fallen viele Zellteilungen an; bei RANK ist es aktiviert, cyclinD1 ist bei der Brustdrüsenentwicklung avtiv
Toll-like Receptor Signaling: es gibt 9 verschiedene toll-like rezeptoren. Nur für 2 ist MyD88 nicht unbedingt erforderlich. Die Rezeptoren erkennen Pathogene wie Viren, Bakterien etc. Sie lösen Kettenreaktionen aus, um dann verschiedene Reaktionen im Immunsystem und im Genom zu aktivieren, um diese Pathogene zu deaktivieren.