Im Berufsleben eines Mikrobiologen geht nicht alles glatt.... wie wahr !!! Unsere erste Klonierung ist eigentlich reibungslos abgelaufen und unser Betreuer hat auch gesagt , dass es ziemlich selten ist , dass man eine Klonierung in so kurzer Zeit fertig bringt . Diesmal droht es schon an der PCR zu scheitern. Alle guten Dinge sind drei ? Von wegen !!! Schon am Freitag hat uns Markus vorgewarnt , dass unsere Ligation fehlschlagen wird , da unser PCR-Produkt ziemlich gering ist und wir deswegen am Montag noch eine PCR ansetzen sollen. Während wir also mit der ersten PCR die Ligatiuon angestezt haben ( Man kann ja nie wissen , vielleicht klappts ja doch ! ) , haben wir die zweiten gestartet , nur mit mehr Template ( also DNA ). Über das Bild des Agarosegels waren wir dann aber nicht sehr glücklich , da zwei Banden zu sehen waren , wo eigentlich nur eine sein sollte und die Bande , die wir haben wollten , sehr schwach war. Also wollte unser Betreuer , dass wir eine dritte PCR ansetzten , in der Zwischenzeit , haben wir schon unsere Bakterien mit ersten PCR-Ligation transferiert und auf Petrischalen gegeben.
Dieses Mal mit einem anderem Puffer. Tja , diese ist aber noch weit mehr in die Hose gegangen da wir gar keine Bande auf der Höhe von 1500 bp ( Basenpaaren ) hatten . Nun hoffen wir mal , dass auf den Petrischalen Bakterien gewachsen sind ,beziehungsweise , dass es dann mit dem zweiten PCR-Produkt funktioniert.
Drückt uns die Daumen ! :D