Zentrifugieren , zentrifugieren und nochmals zentrifugieren !!
21:11 / 21.07.2010
Erste gute Neuigkeit : DIe Übernachtkultur , also die Bakterien , ist gewachsen :D
Somit konnten wir heute die kompetenten Bakterien herstellen , was einfach erklärt so funktioniert , dass man die Bakterien zentrifugiert , Überstand wegleert und dann mehrere Male Wasser hinzufügt und dann wieder den Überstand wegleert und so weiter ...
Leider ist uns währendessen die Zentrifuge "eingegangen" und wir haben dann in kleine Tubes umfüllen müssen und mit einer kleinen Zentrifuge fertig zentrifugieren müssen.
Weiteres fügt man Glycerol hinzu und dann muss man sie auf einzelne Tubes aufteilen und bei -80° C tiefkühlen.. Des weiteren muss man noch überprüfen , ob die Bakterien auch wirklich "funktionieren" , indem man ein Plasmid , bei dem man sicher ist , dass es resistent ist , in die Bakterien mittels Elektroporation transferiert. Das ganze dann noch auf Agarplatten verteilen und über Nacht auf 37°C lagern. Das ganze hat ziemlich lange gedauert und unser Zentrifugenproblem hat das ganze noch mehr in die Länge gezogen. Wir haben aber auch noch unsere Ligation machen müssen , dann diese "Fällen" und ebenfalls in Bakterien transferieren . Wie ihr seht haben wir heute ziemlich viel zu tun gehabt , also werd ich mich nun mal ausruhen gehen ;D
Somit konnten wir heute die kompetenten Bakterien herstellen , was einfach erklärt so funktioniert , dass man die Bakterien zentrifugiert , Überstand wegleert und dann mehrere Male Wasser hinzufügt und dann wieder den Überstand wegleert und so weiter ...
Leider ist uns währendessen die Zentrifuge "eingegangen" und wir haben dann in kleine Tubes umfüllen müssen und mit einer kleinen Zentrifuge fertig zentrifugieren müssen.
Weiteres fügt man Glycerol hinzu und dann muss man sie auf einzelne Tubes aufteilen und bei -80° C tiefkühlen.. Des weiteren muss man noch überprüfen , ob die Bakterien auch wirklich "funktionieren" , indem man ein Plasmid , bei dem man sicher ist , dass es resistent ist , in die Bakterien mittels Elektroporation transferiert. Das ganze dann noch auf Agarplatten verteilen und über Nacht auf 37°C lagern. Das ganze hat ziemlich lange gedauert und unser Zentrifugenproblem hat das ganze noch mehr in die Länge gezogen. Wir haben aber auch noch unsere Ligation machen müssen , dann diese "Fällen" und ebenfalls in Bakterien transferieren . Wie ihr seht haben wir heute ziemlich viel zu tun gehabt , also werd ich mich nun mal ausruhen gehen ;D