Woche 2
10:36 / 30.07.2009
Mo:
Lisa beim RNA Isolieren beobachten, was spannend ist weil die Lösung Phasen ( RNA oben, Proteine in der Mitte und unten DNA) bildet und man das gewünschte "einfach" abheben kann.
Danach RNA in cDNA umschreiben und eine für eine Realtime PCR pipettieren, - die Auswertung von der letzten schaut vielversprechend aus...
Di:
Mauszellen- Blut, Leber und Milz - isolieren, das heißt im Klartext, Maus töten und ausnehmen.
Schaut brutal aus und ist auch so.
Zellen in Kollagen auflösen, nach einer Stunde mit Buffer ( = PBS & Serum) stoppen, zentrifugieren und sieben, wieder waschen und dann nochmal 5 Minuten zentrifugieren.
Später des Tages messen wir die Mauszellen mit Fluoriszenz - sie sollten leuchten, tun sie aber nicht.
Also entweder Maus falsch, Antikörper falsch oder - irgendwas andres falsch ...
Die Auswertung der PCR von gestern schaut seltsam aus - nicht so wie gewünscht ...
Mi:
Ingo beim Western Blot machen zuschauen, also Polyacrylamidgel gießen und Slots befüllen - das Gel ist sehr dünn und die Slots wirklich winzig - eine komplizierte Angelegenheit...
Danach haben wir mit der Lisa Medium für HES Zellen mischen und Zellen passagieren, - jetzt haben wir sozusagen "eigene" :)
Lisa beim RNA Isolieren beobachten, was spannend ist weil die Lösung Phasen ( RNA oben, Proteine in der Mitte und unten DNA) bildet und man das gewünschte "einfach" abheben kann.
Danach RNA in cDNA umschreiben und eine für eine Realtime PCR pipettieren, - die Auswertung von der letzten schaut vielversprechend aus...
Di:
Mauszellen- Blut, Leber und Milz - isolieren, das heißt im Klartext, Maus töten und ausnehmen.
Schaut brutal aus und ist auch so.
Zellen in Kollagen auflösen, nach einer Stunde mit Buffer ( = PBS & Serum) stoppen, zentrifugieren und sieben, wieder waschen und dann nochmal 5 Minuten zentrifugieren.
Später des Tages messen wir die Mauszellen mit Fluoriszenz - sie sollten leuchten, tun sie aber nicht.
Also entweder Maus falsch, Antikörper falsch oder - irgendwas andres falsch ...
Die Auswertung der PCR von gestern schaut seltsam aus - nicht so wie gewünscht ...
Mi:
Ingo beim Western Blot machen zuschauen, also Polyacrylamidgel gießen und Slots befüllen - das Gel ist sehr dünn und die Slots wirklich winzig - eine komplizierte Angelegenheit...
Danach haben wir mit der Lisa Medium für HES Zellen mischen und Zellen passagieren, - jetzt haben wir sozusagen "eigene" :)