Methoden / Experimente
10:41 / 26.06.2009
Hier findest du Platz für deine Forschungsdokumentation.
Forschungsdokumentation
Freitag, 26. Juni 2009
Persönliches / Eindrücke
10:41 / 26.06.2009
Was soll ich sagen? Die Leute hier sind nett, gemütlich, lustig, gescheit =), Andi stichelt zwar gerne, aber ich glaube im Grunde mag er uns Praktikanten.
Wenn wer Kekse daheim hat, nimm sie mit, sie werden sicher aufgegessen, egal wie sie schmecken =).
Wenn wer Kekse daheim hat, nimm sie mit, sie werden sicher aufgegessen, egal wie sie schmecken =).
Probleme / Aufgaben
10:41 / 26.06.2009
13.07.09
Aufgabe: Lernen und verstehen, wie ein AFM funktioniert.
Sicherheitsinstruktione: ich darf fast nichts alleine machen.
14.07.09
Spitzen waschen: Ethanolamin zu den Chips geben, 10 min warten, diese in Petrischalen legen, PBS-Puffer, 10 min warten, das ganze noch 2x wiederholen, dazwischen Kontrolle der Spitzen.
Nasszelle (Ohne Präparat) waschen: erst mit Wasser dest., dann mit SDS (Seifenlauge), dann mit Ethanol oder Isopropanol, und schließlich wieder mit Wasser dest. abspritzen. Auf ein Tuch legen, nicht mehr angreifen.
Behandlung der Platten mit Proteinlayer: Ein Film hat sich gebildet, vorsichtig mit Wasser dest. abspritzen, in Pufferlsg. legen (mit der richtigen Seite nach oben!!!)
Herstellen von Trislsg. und Nickelllsg.: je 200ml
Ausrechnen, wie viel Gramm jeweils benötigt werden:
Molmasse x Stoffmenge x benötigter Menge in l = Masse in g
Einwiegen in Bechergläser, mit Wasser dest. auffüllen, vom Magnetrührer vermischen lassen.
Portionierung in je 1ml
15.07.09
Spitzen waschen, diesmal mit Chloroform unterm Abzug: Chip mit Pinzette nehmen, kurz in Chloroform schwenken, mit Stickstoff trockenblasen.
Die Spitzen werden präpariert und anschl. ca. eine dreiviertel Stunde bis Stunde inkubiert.
Sample (Nasszelle mit Präparat) waschen mit Ly: jeweils 300µl Tris-Ni-Puffer mit Pipette aufnehmen, in Sample spritzen, Ly nimmt aus dem Sample 300µl Flüssigkeit auf, gibt es weg, das ganze wird 50x wiederholt, Achtung: Zelle darf nie trocken werden!
Nase waschen: linke Hand --> Gummihandschuh, Nase drauf. Mit Wasser, SDS, Isopropanol und wieder Wasser gründlich abspritzen, auf Tuch legen.
Die inkubierten Spitzen werden in PBS-Puffer abgewaschen.
Wenn der Cantilever eingespannt wird, muss das schnell gehen, da nichts trocken werden darf.
Dann Kraft messen mit langem Cantilever.
16.07.
Kaffee kochen =)
Nasszelle waschen, Tris-Nickelpuffer mischen, Sample holen, Puffer erneuern, Kurven überwachen, Kurven auswerten,...
woche vom 20. bis 24.07.
das übliche: kurven auswerten, puffer mischen, sample/nasszelle etc. waschen, zuschauen, zuschauen, zuschauen, kaffe kochen,...
Aufgabe: Lernen und verstehen, wie ein AFM funktioniert.
Sicherheitsinstruktione: ich darf fast nichts alleine machen.
14.07.09
Spitzen waschen: Ethanolamin zu den Chips geben, 10 min warten, diese in Petrischalen legen, PBS-Puffer, 10 min warten, das ganze noch 2x wiederholen, dazwischen Kontrolle der Spitzen.
Nasszelle (Ohne Präparat) waschen: erst mit Wasser dest., dann mit SDS (Seifenlauge), dann mit Ethanol oder Isopropanol, und schließlich wieder mit Wasser dest. abspritzen. Auf ein Tuch legen, nicht mehr angreifen.
Behandlung der Platten mit Proteinlayer: Ein Film hat sich gebildet, vorsichtig mit Wasser dest. abspritzen, in Pufferlsg. legen (mit der richtigen Seite nach oben!!!)
Herstellen von Trislsg. und Nickelllsg.: je 200ml
Ausrechnen, wie viel Gramm jeweils benötigt werden:
Molmasse x Stoffmenge x benötigter Menge in l = Masse in g
Einwiegen in Bechergläser, mit Wasser dest. auffüllen, vom Magnetrührer vermischen lassen.
Portionierung in je 1ml
15.07.09
Spitzen waschen, diesmal mit Chloroform unterm Abzug: Chip mit Pinzette nehmen, kurz in Chloroform schwenken, mit Stickstoff trockenblasen.
Die Spitzen werden präpariert und anschl. ca. eine dreiviertel Stunde bis Stunde inkubiert.
Sample (Nasszelle mit Präparat) waschen mit Ly: jeweils 300µl Tris-Ni-Puffer mit Pipette aufnehmen, in Sample spritzen, Ly nimmt aus dem Sample 300µl Flüssigkeit auf, gibt es weg, das ganze wird 50x wiederholt, Achtung: Zelle darf nie trocken werden!
Nase waschen: linke Hand --> Gummihandschuh, Nase drauf. Mit Wasser, SDS, Isopropanol und wieder Wasser gründlich abspritzen, auf Tuch legen.
Die inkubierten Spitzen werden in PBS-Puffer abgewaschen.
Wenn der Cantilever eingespannt wird, muss das schnell gehen, da nichts trocken werden darf.
Dann Kraft messen mit langem Cantilever.
16.07.
Kaffee kochen =)
Nasszelle waschen, Tris-Nickelpuffer mischen, Sample holen, Puffer erneuern, Kurven überwachen, Kurven auswerten,...
woche vom 20. bis 24.07.
das übliche: kurven auswerten, puffer mischen, sample/nasszelle etc. waschen, zuschauen, zuschauen, zuschauen, kaffe kochen,...
