Probleme / Aufgaben
10:16 / 26.06.2009
Hier findest du Platz für deine Forschungsdokumentation.
Forschungsdokumentation
Freitag, 26. Juni 2009
Persönliches / Eindrücke
10:16 / 26.06.2009
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teil 1 - transfizieren
10:16 / 26.06.2009
Die meiste Arbeitszeit verbringe ich ja damit, gemeinsam mit meinem Betreuer Martin Zellen unter dem Mikroskop anzusehen, Abbildungen zu machen und diese anschließend am Computer auszuwerten.
Doch bevor wir das machen können, brauchen wir erst mal Zellen, mit denen wir auch etwas anfangen können. Ein paar Mitarbeiter leisten da schon Vorarbeit, und alles was wir noch machen müssen ist eigentlich das Transfizieren.
Transfizieren nennt man das Einbringen von fremder DNA in Zellen. In unserem Fall verwenden wir DNA der Proteine STIM und ORAI. Vom Labor bekommen wir die DNA, die mittels Punktmutation verändert wurde – das heißt, eine Aminosäure des Proteins wurde verändert – und wir sollen dann sehen, welche Auswirkungen diese Punktmutation hat.
Außerdem sind die Proteine – damit wir später unter dem Mikroskop auch wirklich etwas sehen können – mit CFP (cyan fluorescent protein) und YFP (yellow fluorescent protein) gekennzeichnet.
Das Transfizieren erfordert, je nach Art der Zelle, verschiedene Verfahren. Während es bei manchen Zellen etwas aufwendiger ist, handelt es sich bei den Zellen die wir verwenden, nur um ein bisschen Pipettieren. Die DNA wird mit Medium und einem Mittel vermischt, das die DNA optimal für die Transfektion strukturiert. Nach 20 Minuten Inkubationszeit wird das Ganze über die Zellen gegeben – und ab damit in den Inkubator.
Fortsetzung folgt ;)
Doch bevor wir das machen können, brauchen wir erst mal Zellen, mit denen wir auch etwas anfangen können. Ein paar Mitarbeiter leisten da schon Vorarbeit, und alles was wir noch machen müssen ist eigentlich das Transfizieren.
Transfizieren nennt man das Einbringen von fremder DNA in Zellen. In unserem Fall verwenden wir DNA der Proteine STIM und ORAI. Vom Labor bekommen wir die DNA, die mittels Punktmutation verändert wurde – das heißt, eine Aminosäure des Proteins wurde verändert – und wir sollen dann sehen, welche Auswirkungen diese Punktmutation hat.
Außerdem sind die Proteine – damit wir später unter dem Mikroskop auch wirklich etwas sehen können – mit CFP (cyan fluorescent protein) und YFP (yellow fluorescent protein) gekennzeichnet.
Das Transfizieren erfordert, je nach Art der Zelle, verschiedene Verfahren. Während es bei manchen Zellen etwas aufwendiger ist, handelt es sich bei den Zellen die wir verwenden, nur um ein bisschen Pipettieren. Die DNA wird mit Medium und einem Mittel vermischt, das die DNA optimal für die Transfektion strukturiert. Nach 20 Minuten Inkubationszeit wird das Ganze über die Zellen gegeben – und ab damit in den Inkubator.
Fortsetzung folgt ;)
