zu beginn des tages wurden die membranen vom western blot mit einem TBST-Puffer gewaschen. diesen puffer habe ich vorher sogar selbst hergestellt XD. das waschen ist dazu da, die losen antikörper wegzuwaschen, denn am ende will man nur die auswerten, die wirklich gut haften.
danach kam der sekundärantikörper auf die membranen und wurde 1h lang inkubiert. der sekundärantikörper bindet sich nun aber nicht mehr an die proteine, sondern an die primärantikörper, die auf den proteinen sitzen. nach der einen stunde wurden die losen antikörper wieder weggewaschen.
da man später die membranen mit einem Fuji (ein Gerät) "fotografieren" will, verteilte ich ein substrat auf die membranen. ein enzym vom sekundärantikörper spaltet das substrat, wodurch licht frei wird und so kann man dann ein "Foto schießen".
später analysierte ich noch die daten der zweiten assay mit excel und meine zellen splittete ich auch noch.