TAG 13: PCR I
01:16 / 28.08.2009
es war wieder einmal mittwoch, also meeting um 9 uhr. und dieses mal kam ich sogar pünktlich. XD
anschließend starteten wir endlich mit der PCR, die wir zum mutanten herstellen anwenden.
eine PCR (=Polymerase Chain Reaction) ist eine methode, die DNA zu vervielfältigen.
zuerst die zutaten:
-taq-Polymerase (kopiert DNA-Abschnitt)
-10x Puffer
-dNTP (basenbausteine für den synthetisierten DNA-Strang)
-2 Primer (um den zu kopierenden abschnitt zu begrenzen)
-DNA
-Wasser
-MgCl2 (für die funktion der polymerase essentiell)
rezept:
zuerst mischte ich einen mastermix aus puffer, dNTP, H2O und MgCl2. verena mischte in der zwischenzeit DNA und den entsprechenden primer. anschließend wird der mastermix zu der DNA mit den primern dazupipettiert. danach kam die taq-polymerase dazu und am ende kamen die eppis über nacht in eine PCR-Maschine.
anschließend starteten wir endlich mit der PCR, die wir zum mutanten herstellen anwenden.
eine PCR (=Polymerase Chain Reaction) ist eine methode, die DNA zu vervielfältigen.
zuerst die zutaten:
-taq-Polymerase (kopiert DNA-Abschnitt)
-10x Puffer
-dNTP (basenbausteine für den synthetisierten DNA-Strang)
-2 Primer (um den zu kopierenden abschnitt zu begrenzen)
-DNA
-Wasser
-MgCl2 (für die funktion der polymerase essentiell)
rezept:
zuerst mischte ich einen mastermix aus puffer, dNTP, H2O und MgCl2. verena mischte in der zwischenzeit DNA und den entsprechenden primer. anschließend wird der mastermix zu der DNA mit den primern dazupipettiert. danach kam die taq-polymerase dazu und am ende kamen die eppis über nacht in eine PCR-Maschine.
