Der Western-Blot gibt nun endlich Aufschluss ob die Arbeit der letzten Tage auch erfolgreich war. Nachdem die Zellen geerntet worden sind, habe ich sie auf ein SDS-Gel aufgetragen und durch eine Elektrohorese getrennt. Ein Gel wurde danach geblottet (durch eine zweite Elektrophorese auf eine Membran übertragen und mit Antikörpern weiter behandelt um die bestimmten Proteine zu markieren). Das andere wurde mit Commassie Blau eingefärbt um die VORHANDENEN Proteinbahnen anzuzeigen.

GENAU PROTEINE - BAUSTOFFE DES LEBENS!!!
Ja weiter gehts. Die Zellen kommen von ihrem nächtlichen Ausflug in dem Inkubator zurück in die sterile kalte Stahl-Lami. Dort werden sie mit den Proteinen YFP-P1 und CFP-C1 beladen. Jetzt sind die Zellen auf zwei 6-Well Platten aufgeteilt und jeweils nach den Proteinen getrennt.
Die Verteilung pro Plate sieht ungefähr folgendermaßen aus:

P1 C1 P1/C1

P1 C1 X ( keine Proteine)

Zurück in den warmen Inkubator! Man möge gespannt sein.

Ich will euch nicht mit langweiligen Details über meinen Weg zum Institut für molekulare Biowissenschaften oder meinen Erwartungen nerven, also komme ich gleich zur Sache. Am ersten Tag stand die Zellkultur im Mittelpunkt. Die schon gezüchteten COS-7 Zellen ( sind Niere Zellen der grünen Meerkatze, wen´s intressiert) wurden gesplittet und gezählt. Nun haben wir sie verdünnt und auf sogenannte 6-Well Platten aufgebracht. Über Nacht können sie sich nun vermehren und die Weltherschaft an sich reißen.