Meggies Webblog

Heute habe ich eine Wiederholung der Gelelektrophorese von D2, C6 und P5 gemacht, da die letzte nicht wirklich gut funktioniert hat. Ich habe wieder 3 Lösungen hergestellt:

1. Lösung D2: 5 Mikroliter 10 mal fast digest Puffer
3 Mikroliter ECO R1
42 Mikroliter D2

2. Lösung C6: 5 Mikroliter 10 mal fast digest Puffer
3 Mikroliter ECO R1
42 Mikroliter C6

3. Lösung P5: 5 Mikroliter 10 mal fast digest Puffer
3 Mikroliter ECO R1
42 Mikroliter P5

Diese kamen in den Inkubator bei 37 Grad Celsius für ca 2 h. Dann habe ich die Gelelektrophorese gemacht.
Doch auch diesmal war die Konzentration nicht sehr hoch.


Danach habe ich eine PCR mit D2, C6 und P5 durchgeführt. Dies hat leider garnichts gebracht, denn als ich dann die Gelelektrophorese durchgeführt hatte, war die Konzentration so gut wie nicht vorhanden.

Schließlich habe ich noch eine MINI Isolation von der DNA V+F gemacht. 18 Klone habe ich von der Ampicilinplatte gepickt und danach die MINI Präperation durchgeführt. Als ich die 18 DNA Klone isoliert hatte, habe ich noch eine Gelelektrophorese gemacht um die 18 Klone zu vergleichen. Das Ergebnis war, dass die Klone Nr 15 und Nr 17 am meisten DNA konzentriert waren. Also habe ich die Konzentration dieser beiden gemessen. Mir ist dabei eine sehr hohe Konzentration herausgekommen, worüber ich sehr froh war.