Laboralltag hoch 2 !
19:33 / 23.09.2009
Der Dienstag begann mit einer Besprechung über den derzeitigen Stand der Forschungen und über die zukünftigen Tätigkeiten im Projekt.
Danach musste ich zunächst ein neues Medium herstellen; sogenanntes CaCo-Medium. Dieses Medium wird speziell für die Kultivierung von Krebszellen; es enthält weniger Nährstoffe, da die Krebszellen sonst zu stark wachsen würden. Danach mussten in flüssigem Stickstoff gelagerte CaCo-Zellen, MEF-Zellen (Mouse Embryonal Feeder; diese Zellen sollen auf dem Boden der Kulturflaschen wachsen und diesen vollständig bedecken und damit anderen Zellen (der eigentlichen Zellkultur) als eine Art Wachstumsuntergrund dienen) und TE 671-Zellen (eine weitere Krebszellen-Kultur) aufgetaut werden um ihren Zustand zu kontrollieren. Dazu wurden sie nach dem Auftauen mit Medium versetzt und in neue Kulturflaschen gefüllt. Anschließend wurden sie inkubiert um zu überprüfen, ob die Zellen auf dem Boden der Kulturflasche anwachsen.
Bei den Zellkulturen, die derzeit das kurze Protokoll durchlaufen (siehe frühere Weblogeinträge) wurde eine RNA-Isolierung durchgeführt. Wir benutzten dafür ein kommerzielles Kit, welches bereits alle notwendigen Reagenzien inkludiert hatte. Nach der Isolierung wurde die RNA in flüssigem Stickstoff eingefroren.
Der Mittwoch begann wie viele meiner Tage am ZMF: mit dem Aufbereiten von Liquor. Diesmal war allerdings nur eine kleine Menge Liquor vorhanden, sodass ich keinen besonders großen Aufwand hatte. Danach wurden die CaCo-, MEF- und TE 671-Kulturen von gestern auf ihren Zustand überprüft. MEF und TE 671 sahen sehr gut aus; die CaCo-Zellen schienen allerdings abgestorben zu sein (wenn sie denn je gelebt hatten). Deshalb wurden noch mehr CaCo-Zellen aufgetaut und mit Medium in Kulturflaschen überführt. Zu Ende des Tages stellte sich allerdings heraus, dass auch diese abgestorben waren. Es wurden also komplett neue Zellkulturen bestellt. Bei den Zellkulturen des kurzen Protokolls musste ich wieder Retinsäure hinzufügen. Zwei andere Zellkulturen waren bereits so dicht, dass ich sie splitten musste. Sie wurden im Verhältnis 1:1 gesplittet, zwei Kulturflasks also auf vier neue aufgeteilt. Das wars dann mehr oder weniger auch für den Mittwoch.
==============THINGS TO THINK ABOUT==========
Heute nur ein Zitat:
"Man könnte auch behaupten DNA sei lediglich ein Programm, das zur Selbsterhaltung programmiert wurde. (........) Wenn das Leben als Spezier organisiert auftritt braucht es Gene, die sein Gedächtnissystem bilden. Der Mensch ist also lediglich wegen seines unfassbaren Gedächtnisses ein Individuum. Es lässt sich nicht definieren, aber es definiert die Menschheit." -Ghost in the Shell
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Danach musste ich zunächst ein neues Medium herstellen; sogenanntes CaCo-Medium. Dieses Medium wird speziell für die Kultivierung von Krebszellen; es enthält weniger Nährstoffe, da die Krebszellen sonst zu stark wachsen würden. Danach mussten in flüssigem Stickstoff gelagerte CaCo-Zellen, MEF-Zellen (Mouse Embryonal Feeder; diese Zellen sollen auf dem Boden der Kulturflaschen wachsen und diesen vollständig bedecken und damit anderen Zellen (der eigentlichen Zellkultur) als eine Art Wachstumsuntergrund dienen) und TE 671-Zellen (eine weitere Krebszellen-Kultur) aufgetaut werden um ihren Zustand zu kontrollieren. Dazu wurden sie nach dem Auftauen mit Medium versetzt und in neue Kulturflaschen gefüllt. Anschließend wurden sie inkubiert um zu überprüfen, ob die Zellen auf dem Boden der Kulturflasche anwachsen.
Bei den Zellkulturen, die derzeit das kurze Protokoll durchlaufen (siehe frühere Weblogeinträge) wurde eine RNA-Isolierung durchgeführt. Wir benutzten dafür ein kommerzielles Kit, welches bereits alle notwendigen Reagenzien inkludiert hatte. Nach der Isolierung wurde die RNA in flüssigem Stickstoff eingefroren.
Der Mittwoch begann wie viele meiner Tage am ZMF: mit dem Aufbereiten von Liquor. Diesmal war allerdings nur eine kleine Menge Liquor vorhanden, sodass ich keinen besonders großen Aufwand hatte. Danach wurden die CaCo-, MEF- und TE 671-Kulturen von gestern auf ihren Zustand überprüft. MEF und TE 671 sahen sehr gut aus; die CaCo-Zellen schienen allerdings abgestorben zu sein (wenn sie denn je gelebt hatten). Deshalb wurden noch mehr CaCo-Zellen aufgetaut und mit Medium in Kulturflaschen überführt. Zu Ende des Tages stellte sich allerdings heraus, dass auch diese abgestorben waren. Es wurden also komplett neue Zellkulturen bestellt. Bei den Zellkulturen des kurzen Protokolls musste ich wieder Retinsäure hinzufügen. Zwei andere Zellkulturen waren bereits so dicht, dass ich sie splitten musste. Sie wurden im Verhältnis 1:1 gesplittet, zwei Kulturflasks also auf vier neue aufgeteilt. Das wars dann mehr oder weniger auch für den Mittwoch.
==============THINGS TO THINK ABOUT==========
Heute nur ein Zitat:
"Man könnte auch behaupten DNA sei lediglich ein Programm, das zur Selbsterhaltung programmiert wurde. (........) Wenn das Leben als Spezier organisiert auftritt braucht es Gene, die sein Gedächtnissystem bilden. Der Mensch ist also lediglich wegen seines unfassbaren Gedächtnisses ein Individuum. Es lässt sich nicht definieren, aber es definiert die Menschheit." -Ghost in the Shell
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