18.08.2010
10:45 / 18.08.2010
Heute begann der Tag mit der Präparation des zweiten Antikörpers. Hierzu mussten die Membranen mit Milchbuffer auf der Wippe gewaschen werden. Der zweite Antikörper wirkt dann (vermischt mit Milchbuffer) 40 Minuten lang ein. Auch nach dem zweiten Antikörper erfolgt ein Waschgang. Dann erfolgt das Entwickeln und Färben.
Solution A und Solution Be (40:1) wird immer wieder über die Membran pipettiert, danach wird die Membran in Frischhaltefolie verpackt, abgetupft und in die Filmkasette geklebt. In der Dunkelkammer wird der Film aufgelegt, welcher zwischen einem Zeitraum von 5 - 60 Minuten entwickelt sein kann. Zuletzt wurden noch die Standards eingezeichnet, und mein erster Western Blot war fertig . Insgesamt ist der Western Blot Test aufwendiger als der Elisa Test und es würde noch einiger Durchgänge bedürfen, bis ich wirklich alle Schritte selbstständig durchführen könnte, aber ich befürchte dafür wird die Zeit leider nicht reichen. Ich bin dennoch dankbar auch diese Testform kennen gelernt zu haben.
Solution A und Solution Be (40:1) wird immer wieder über die Membran pipettiert, danach wird die Membran in Frischhaltefolie verpackt, abgetupft und in die Filmkasette geklebt. In der Dunkelkammer wird der Film aufgelegt, welcher zwischen einem Zeitraum von 5 - 60 Minuten entwickelt sein kann. Zuletzt wurden noch die Standards eingezeichnet, und mein erster Western Blot war fertig . Insgesamt ist der Western Blot Test aufwendiger als der Elisa Test und es würde noch einiger Durchgänge bedürfen, bis ich wirklich alle Schritte selbstständig durchführen könnte, aber ich befürchte dafür wird die Zeit leider nicht reichen. Ich bin dennoch dankbar auch diese Testform kennen gelernt zu haben.