Ich möchte mich noch bei allen bedanken die meine oft sehr langen Einträge gelesen haben und vorallem bei denen die mir Kommentare geschrieben haben!
Ein großes, sehr großes Dankeschön geht auch an Giovanni und an Christine die mich auch bei den ganzen vielen Fehlern und negativen Ergebnissen immer aufs neue mit Witzen, Spaß,... motiviert hat/haben.
Danke
Lg Sabine

Hi!
Heute ist mein letzter Tag an der Boku in Wien.
Ich habe heute das letzte Mal Minipreps gemacht(1-8) davon waren die letzen 3 positiv die anderen leider nicht... :.( aber wenigstens die 3 anderen.
So dann habe ich noch am Nachmittag meine Minipreps verdaut und sie wieder/ das letzte Mal auf 37°C für ca.2 Stunden gegeben inzwischen habe ich Kanamecin-Platten gegossen( mit aufschmelzen, Resistenz zugeben, und gießen)... So jetzt habe ich gerade mein Gel angeschaut und es ist nur ser Vektor zu sehen -> noch einmal auftragen!So jetzt werde ich dann noch schauen ob positiv ist und dann werde ich mich noch von allen verabschieden :.(....

An alle die noch Praktikum haben:
Nutzt jeden Tag und freut euch über euer Praktikum dann es verging wie im Flug!

Obwohl ich länger als 4 Wochen mein Praktikum hatte bereue ich das es jetzt schon vorbei ist! Ich bin der Meinung das es sich genau jetzt für mich auszahlen würde noch länger zu bleiben, da ich jetzt schon alles verstehe, Vorgänge alleine mache etc.- schade dass es schon vorbei ist.

Ich finde es hat sich auf jedenfall ausgezahlt das Praktikum zu machen und deshalb werde ich versuchen mich nächstes Jahr wieder anzumelden! :.)

Noch einmal viel Spaß bei eurem Praktikum und nicht verzweifeln wenn einmal oder mehrmals etwas schiefgeht das passiert uns allen mir ist es jedenfalls sehr oft was daneben gegangen, aber was solls wir sind da um etwas zu lernen und das ist die Hauptsache!!
Tschau und auf baldiges wiederblogen
Sabine Mansky!
P.S: Ich wünsche Zita alles Gute und viel Spaß bei ihrem Praktikum!

Hi
So dann werde ich mal meinen heutigen Beitrag fortsetzen:
Ich habe dann noch eine Ligation gemacht mit Umfällen und so!!
Jetzt werde ich dann auch noch schießen, sie dann auf 37°C für 20 min stellen und dann ausplattieren und ja die Kolonien muss ich noch ansetzen! :.) Das kann ich wenigstens schon!
Lg Sabine

Hi @ all
Am Vormittag habe ich meinen verdauten Vektor gereinigt und dann 2 ul aufs Gel aufgetragen und es hat sich heraus gestellt dass ich wahrscheinlich irgendwo bei der Reinigung den Vektor verloren habe! Naja dann habe ich gesehen das auf meinen Platten einige Kolonien gewachsen sind die ich auch noch over night ansetzen werde. Aja den Loading Dye habe ich auch noch nachgefüllt...
Und noch etwas es war so ca. um 11 Uhr Feuerarlam, aber nichts schlimmes wir konnten bald wieder hinein.
So das wars von Vormittag
Lg Sabine

Der zweite Sommer, in dem ich Gen-Au SommerschülerInnen (in diesem Fall echte –innen) in meinem Labor mitmischen lassen darf. Tolle Idee von Gen-Au, eine wirklich gute Gelegenheit für Schüler, ein bisschen reinzuschnuppern in den Labor-Alltag und eine große Hilfe bei der Studien- bzw. Berufswahl. Wie auch letztes Jahr hatten wir großes Glück mit der Zuteilung. Franziska und Sabine waren ausgesprochen geschickt, und aufnahmefähig, interessiert an unserem „Leben“, sehr neugierig und engagiert. Schnell haben sie sich in unsere Arbeitsgruppe eingefügt und zur guten Stimmung im Labor beigetragen. Ich bin sicher, dass die beiden sehr erfolgreich ins weitere Lernen springen werden, und wer weiß, vielleicht sehen wir uns ja bei einem Praktikum oder der Diplomarbeit wieder – ich würd’ mich freuen.

Hi!
Von Vormittag habe ich ja schon geschrieben aber von Nachmittag noch nicht!
Also ich habe jetzt die Plasmide in die Bakterien geschossen und es hat nicht geknallt! :.) Und ich hatte gar nicht so schlechte Ergebnisse! so jetzt "liegen" die Bakterien noch auf 37°C für 20 min und dann werden sie ausplattiert und auf 37°C bis Morgen gestellt! Dann werde ich heute nur noch meinen Vektor, den ich übrigens aufs Gel aufgetragen hab und der positiv war, reinigen und das wars dann!
Lg Sabine
P.S: Finde es schade das mein Praktikum schon bald aus ist!!

Hi!
Heute habe ich in der Früh meine Ligation vom Wochenende weiter gemacht und sie steht derzeit auf Eis! dann habe ich auch noch ca. 2 ul von Gosias Vektor pET 30a verdaut und der läuft jetzt für 2 Stunden am 37°C Block! So jetzt werde ich noch schießen und von dem verdauten Vektor 2ul aufs Gel auftragen! Und mal sehen was ich sonst noch mache...
Lg Sabine

Hi @ all!!
In der Früh habe ich meine angesetzten Minipreps gepräpt!Die waren am Gel dann leider negativ!! Und dann habe ich noch Kuvetten geklebt und wiedereinmal eine neue Ligation übers Wochenende "angesetzt".
Und ich war total froh als ich Christine und Giovanni gefragt habe ob ich eventuell noch Montag, Dienstag und Mittwoch kommen kann und sie kein Problem gesagt haben! Mir gefällt es hier so gut ich werde das alles vermissen also werdet ihr auch noch nächste Woche( zumindest die ersten 3 Tage ) etwas von mir hören(indem ich Einträge schreibe!!)!
Lg und bis bald
Sabine!

Hi!
Gestern habe ich in der Früh die angesetzten Minipreps von Christine gemacht und sie waren positiv!!!
Dann habe ich meine Minipreps mit dem Vektor pET 30a +Spice angesetzt! Und die Platten( die ich am vorigen Tag ausplattiert habe werde ich noch wachsen lassen da bisher keine Kolonien gewachsen sind!!
So das wars von gestern!!
Lg Sabine!!

Hi!
Heute habe ich in der Früh gleich Spitzen gesteckt ca. 20 boxen! (Alle möglichen Farben!)
Dann habe ich noch PCR- Screnning mit pET30a Primern gemacht und schlussendlich wiedereinmal am Gel angeschaut! -> negativ!
Jetzt habe ich noch eine Ligation mit meinen pET30a Vektoren und zwei anderen von Christine gemacht und bin gerade dabe sie Umzufällen( bei Schritt 20 min Zentrifugieren)!
Dann werde ich noch 3ul von meinen und 5ul von ihren am Gel anschauen den Rest werde ich schießen. Dann noch meine auf einer Ampicillin- Platte ausplattieren Christine ihre auf Kanamecin, später noch in den 37°C Raum und dann geh ich nach Hause!!
Naja ich habe noch einiges vor
Lg Sabine
P.S: Ich mach deswegen heute so viel für Christine mit weil sie krank und nach Hause gegangen ist und mich gebeten hat einige Proben von ihr mitzumachen!( Ich habe jetzt nicht einmal jemanden den ich fragen kann) Naja es wird schon schief gehen!

Hi!
Heute habe ich in der Früh die von mir von Gosia's Masterplate angesetzten Kolonien minigeprept! Die habe ich dann auf dem Gel angeschaut und sie waren stark konsentriert und positiv!!!!
Dann habe ich noch den Mix für die Verdauung der Minipreps gemixt und in 5 ul Probe hineingegeben und dann 2 Stunden(!!)( ur langweilig) auf 37°C gegeben und dann auf dem Gel angeschaut!
Ergebnis: POSITIV!!! Man hat Insert und Vektor gesehen!
Das einzige was mich jetzt aufregt ist: Wenn ich die Kolonien, Experimente, Aufgaben,... von anderen mach werden sie positiv aber meine eigenen Arbeiten an meinem Projekt werden negativ!!! :.(
Naja ich muss jetzt aufhören noch andere müssen zum Computer!!
Lg und tschau Sabine!!
P.S: freu mich das ich endlich 2 Einträge habe!!

Hi @ all!

Mein Arbeitstag begann heute mit einer Ligation! Dafür braucht man: den Vektor,Insert, Ligase T4 DNA, Lig. Buffer und natürlich Wasser(AD).

Dann habe ich eine Umfällung der Ligase vorgenommen!
2 ul 3 Molar Na Acetat, 40ul 96% EtOH(2x Volumen)
und falls vorhanden 1ul Glykogen( wir hatten es nicht)! das Glykogen ist zum Sichtbar machen des Pellets! Dann
wird geschüttelt, 30min auf -20°C gelagert, zentrifugiert, Alkohol zugefügt und nach zentrifugation wieder vorsichtig entnommen, und schlussendlich wird das Pellet luftgetrocknet und in 10 ul H2O gelöst!

Als nächstes habe ich etwas über die T4 DNA Ligase recherchiert und am Nachmittag dann Bakterien geschossen( Trafo, Elektrophorator) ziemlich niedere Werte bekommen leider!( 14,8; 15,7) aber zum Glück kein "Kurzschluss"!

Dann habe ich noch für Christine etwas aufs Gel aufgetragen das positiv war und jetzt am Abend noch Bakterien ausplattiert und für eine Praktikantin Minipreps over night angesetzt!
So das wars für haute
Lg und viel Spaß bei eurem Praktikum
Sabine

Hi!
Am Freitag habe ich unter anderem mit Max Agarose Gele gegossen. Dann habe ich noch Miniprep von meinen Kolonien gemacht-negativ und den Vektor in ein Gel aufgetragen und angeschaut-positiv. juhuu!
Aja Kolonien umplattiert habe ich auch wieder!
So das war's mal wieder
tschau sabine